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天津本生簡(jiǎn)述:影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素
更新時(shí)間:2020-08-21瀏覽:1481次

  天津本生簡(jiǎn)述:影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素

  一、試劑盒

  1、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)降低或失活,結(jié)果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高,對(duì)雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高,實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽(yáng)性;

  2、酶結(jié)合物濃度過高,也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。

  二、試驗(yàn)儀器

  1、ELISA試劑盒加樣器是否經(jīng)過校正,酶免測(cè)定血清用血量很少,如手工加樣器的性能不好,吸取樣品不,會(huì)使結(jié)果忽高忽低;

  2、每次洗板前,應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無堵塞。

  三、操作

  1、檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,以免造成試驗(yàn)結(jié)果假性降低;

  2、加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;

  3、洗滌不充分,會(huì)使結(jié)果假性增高,過分洗滌呈假陰性;

  4、比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí),底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高;

  5、抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡,依賴于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落,溫度低于4℃,影響反應(yīng)速度。

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