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本生歸納總結(jié):抗原抗體反應(yīng)原理特點(diǎn)
更新時(shí)間:2023-01-05瀏覽:1031次

  本生歸納總結(jié):抗原抗體反應(yīng)原理特點(diǎn)


  抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行,也可以在機(jī)體外進(jìn)行??乖贵w反應(yīng)的過程是經(jīng)過一系列的化學(xué)和物理變化,包括抗原抗體特異性結(jié)合和非特異性促凝聚兩個(gè)階段,以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的變化。

  由于抗體主要存在于血清中,在抗原或抗體檢測中多以血清為試驗(yàn)材料,故將體外抗原抗體的免疫學(xué)反應(yīng)也稱作血清學(xué)反應(yīng)(serological reaction)。該反應(yīng)既可用已知的抗原檢測未知的抗體,這是臨床上常用的血清學(xué)診斷方法;也可用已知的抗體檢測未知的抗原,如微生物及其代謝產(chǎn)物、激素、藥物鑒定等的檢測

  抗原抗體反應(yīng)反應(yīng)特點(diǎn)

  抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)主要有四性:即特異性、比例性、可逆性,階段性。

  特異性: 是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性確定的。這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應(yīng)用。隨著免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步,還將在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域得到更加深入和廣泛的應(yīng)用,比如腫瘤的診斷和特異性治療等。

  比例性: 是指抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系,只有當(dāng)二者濃度比例適當(dāng)時(shí)才出現(xiàn)可見反應(yīng),在抗原抗體比例相當(dāng)或抗原稍過剩的情況下,反應(yīng)最,形成的免疫復(fù)合物沉淀最多、最大。而當(dāng)抗原抗體比例超過此范圍時(shí),反應(yīng)速度和沉淀物量都會(huì)迅速降低甚至不出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)。

  可逆性: 是指抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物后,在一定條件下又可解離恢復(fù)為抗原與抗體的特性。由于抗原抗體反應(yīng)是分子表面的非共價(jià)鍵結(jié)合,所形成的復(fù)合物并不牢固,可以隨時(shí)解離,解離后的抗原抗體仍保持原來的理化特征和生物學(xué)活性。

  階段性:抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段,第一個(gè)階段為抗原抗體的特異性結(jié)合階段,此階段是抗原與抗體間互補(bǔ)的非共價(jià)結(jié)合,反應(yīng)迅速,可在數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)完成,一般不出現(xiàn)肉眼可見的反應(yīng)現(xiàn)象。第二個(gè)階段為可見反應(yīng)階段,是小的抗原抗體復(fù)合物間靠正、負(fù)電荷吸引形成較大復(fù)合物的過程。此階段反應(yīng)慢,需要時(shí)間從數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)至數(shù)日不等,且易受多種因素和反應(yīng)條件的影響 。

  本生抗原抗體反應(yīng)影響因素

  電解質(zhì):抗原和抗體通常為蛋白質(zhì)分子,等電點(diǎn)分別為pH 3~5和pH 5~6,在中性或:弱堿性的環(huán)境中,表面均帶負(fù)電荷,適當(dāng)濃度的電解質(zhì)會(huì)使他們失去一部分負(fù)電荷而相互結(jié)合,出現(xiàn)肉眼可見的凝集或沉淀現(xiàn)象:在抗原抗體反應(yīng)中,常用0.85%的NaCI溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液,以提供適當(dāng)濃度的電解質(zhì)。

  溫度:抗原抗體反應(yīng)必須在適宜的溫度中進(jìn)行,一般為15~40℃,通常最適為37℃。一定范圍內(nèi),溫度升高,可促進(jìn)抗原抗體分子問的碰撞機(jī)會(huì),加速抗原抗體復(fù)合物的形成,加快可見反應(yīng)的速度,若溫度高于56℃,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞;溫度越低,結(jié)合速度越慢,但結(jié)合牢固,易于觀察。某些特殊的抗原抗體反應(yīng),對(duì)反應(yīng)溫度有特殊要求,如冷凝集素在4℃左右與紅細(xì)胞結(jié)合最好,20℃以上反而解離。

  酸堿度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的酸堿度環(huán)境中進(jìn)行,pH過高或過低都將影響抗原:抗體的理化性質(zhì),抗原抗體反應(yīng)的最適酸堿度為pH 6~8。此外,當(dāng)pH達(dá)到或接近顆粒性抗原的等電點(diǎn)時(shí),即使沒有相應(yīng)抗體存在時(shí),也會(huì)引起抗原非特異性凝集,即自凝,造成假陽性反應(yīng),嚴(yán)重影響試驗(yàn)的可靠性。

  抗原抗體反應(yīng)反應(yīng)原理

  抗體能特異性地識(shí)別相應(yīng)的抗原,并與之結(jié)合。這種結(jié)合在體外也能發(fā)生,這種特性就是許多免疫檢測方法的基礎(chǔ)??乖c抗體相互作用是非共價(jià)的,可逆的,其特性符合許多化學(xué)反應(yīng)的基本原理。但因?yàn)榭贵w分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),以及抗原分子結(jié)構(gòu)的多樣性,使抗原抗體結(jié)合反應(yīng)表現(xiàn)出復(fù)雜性 。

  交叉反應(yīng)

  抗體特異性與交叉反應(yīng):抗體是特異的。只與相應(yīng)抗原反應(yīng)。實(shí)際制備的抗體卻常有非特異性反應(yīng),這是因?yàn)榭乖患冊斐傻摹6嘟M分抗原之間存在共同的抗原決定簇,或者兩個(gè)抗原決定簇結(jié)構(gòu)類似能與同一抗體結(jié)合,均可出現(xiàn)抗體與異源抗原的交叉反應(yīng)。用瓊脂雙擴(kuò)散能簡便直觀地反映不同抗原與同一抗血清,或不同抗血清與同一抗原的交叉反應(yīng)。

  本生抗原抗體反應(yīng)應(yīng)用

  抗原:免疫動(dòng)物是制備抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、細(xì)菌或者其他蛋白質(zhì)抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必須與大分子載體連接??乖挠昧恳暱乖N類及動(dòng)物而異,—次注射小鼠可以少至幾個(gè)微克,免、羊甚至更大的動(dòng)物每次注射的量就相應(yīng)增加,從幾百μg/次至幾mg/次。

  佐劑及乳化:佐劑可以幫助抗原在注射部位緩慢釋放,以增加免疫刺激的效果。佐劑有和不佐劑之分。全佐劑加有滅活的分枝桿菌(如卡介苗)或棒狀桿菌。福氏佐劑可從試劑公司購買,也可用羊毛脂和石蠟油按1:2—4混合自行制備。佐劑與抗原按1:1的比例混合乳化為均勻的乳液,放置后不會(huì)發(fā)生油水分離。

  免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物如豚鼠、家兔、小鼠、大鼠等,如果大量生產(chǎn)可用動(dòng)物羊、馬等,動(dòng)物接受免疫的乳液量小鼠為1.0—2.0 mL,家兔為2—4mL??乖庖邉?dòng)物的途徑取決于動(dòng)物種類、抗原特性和是否使用佐劑。腹腔注射(i.p),肌肉注射(i.m),皮內(nèi)注射(i.d.)和皮下注射(s.c.)適合于任何抗原,這些途徑主要刺激局部淋巴結(jié)發(fā)生免疫應(yīng)答,初次免疫和免疫加強(qiáng)注射均可使用。靜脈注射(i.v.)則只適合于可溶性抗原及分散的單細(xì)胞懸液,且不能使用佐劑,其誘發(fā)的免疫應(yīng)答主要發(fā)生在脾臟。此外,在單克隆抗體制備時(shí),亦可用脾臟直接注射或體外免疫方法,尤其對(duì)微量抗原比較實(shí)用。體外免疫方法也常用于人源單克隆抗體的制備。體外免疫時(shí)將脾細(xì)胞或外周血淋巴細(xì)胞(包括B細(xì)胞,T細(xì)胞及抗原遞呈細(xì)胞)與抗原一起作體外培養(yǎng),然后再與骨髓瘤細(xì)胞融合。初次免疫后要經(jīng)過2—3次以上的免疫加強(qiáng)以保證能形成較高水平的IgG抗體。兩次免疫注射之間的時(shí)間間隔,一般3—4周比較適合大部分動(dòng)物,小動(dòng)物可間隔10—14d,大動(dòng)物則在2月左右。在免疫加強(qiáng)最后一次注射后的一周內(nèi)采集抗血清,可獲得高水平的抗體 。

  抗原抗體 本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

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