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教您怎么完善ELISA試劑盒試驗中的過錯?2023資料已更新
ELISA操作過程多,新手操作難免會有過錯。而這些過錯許多是由細節(jié)不夠好形成的,減少過錯的辦法有許多,比方做試驗時少說話,避免唾液掉進酶標條中。當然,大家還要學會自己開掘問題,找出原因。BUNSEN本生教您怎么完善ELISA試劑盒試驗中的過錯?
1,評價試劑的實用性,試劑的安穩(wěn)與否,對準確率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品重復比照試驗,判定試劑符合要求后方可運用。
2,操作前仔細閱讀說明書,嚴厲按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不行混用。值得改善的地方,重復試驗確認建立后才能改善,比方洗板次數(shù)的掌握等。
3,加樣要準確、快速。加樣不準確,酶生成物的量不能確認,直接影響顯色成果。別的,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和停止液的量有關,所以加樣應慎重。要求在必定時刻內加樣完畢的試驗,如果加樣緩慢,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長期暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短乃至失效。
4,檢驗技師應具有從事試驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作試驗儀器、器械,具有必定總結和剖析問題的才能,對試驗中出現(xiàn)的意外狀況能及時妥善解決。
5,運用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
6,嚴格掌握顯色時刻,顯色時刻過短,加入停止液反響停止后,底物結合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時刻后顯色,應判為假陽性,這或許與試劑自身有關。加顯色劑后當即顯色,不行報陽性,這或許是本底顯色的成果。
7,洗刷*,洗板不*,ELISA試劑盒酶結合物本底顯色會出現(xiàn)假陽性。別的,洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許出現(xiàn)假陽性。
8,嚴控反響時刻,反響時刻過長,酶失活;反響時刻過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都或許形成假陰性。
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