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熒光定量PCR耗材的使用方法,快來(lái)學(xué)習(xí)下吧
更新時(shí)間:2023-02-24瀏覽:516次
  熒光定量PCR耗材具有很高的純凈度和穩(wěn)定性,能更好適應(yīng)PCR反應(yīng)過(guò)程中反復(fù)高低溫設(shè)定,并且能夠?qū)崿F(xiàn)高溫高壓滅菌操作,常常被用于PCR耗材的生產(chǎn)。隨著熒光定量PCR技術(shù)的普及,該技術(shù)被廣泛用于遺傳、生化、免疫、醫(yī)藥等領(lǐng)域,不僅應(yīng)用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的研究領(lǐng)域。
 
  熒光定量PCR耗材的使用方法如下:
 
  1、PCR板有透明和乳白色可選,其中乳白色更適合用于頂部采集熒光信號(hào)的新型熒光定量PCR儀(如伯樂(lè)CFX系列,ABI7500fast以上型號(hào),Roche480系列),但如果熒光定量PCR儀是底部光源的,則應(yīng)選擇透明的。
 
  2、PCR板根據(jù)裙邊設(shè)計(jì)又可分為無(wú)裙邊、半裙邊和全裙邊三種設(shè)計(jì)模式,不同廠家的熒光定量PCR儀會(huì)設(shè)計(jì)不同的切角或邊緣凸起,請(qǐng)選擇適合該P(yáng)CR儀的板子。
 
  3、PCR板又分100ul體積(矮板)和200ul體積(高板),根據(jù)機(jī)型的不同選擇,選擇不同高度孔板,避免高度錯(cuò)誤對(duì)機(jī)器造成破壞和加熱不均導(dǎo)致數(shù)據(jù)失真。
 
  4、當(dāng)使用96孔板做熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,推薦使用光學(xué)膜代來(lái)密封反應(yīng)孔。
 
  5、加樣后會(huì)在管壁上飛濺一些小液滴,另外反應(yīng)體系內(nèi)也會(huì)有一些氣泡,需要離心去掉掛壁液滴和氣泡。請(qǐng)使用專用的微孔板離心機(jī)解決上述問(wèn)題。
 
  6、PCR板屬于一次性消耗品,生產(chǎn)一次成型,不建議剪開使用容易造成實(shí)驗(yàn)誤差增加,不能清洗或部分重復(fù)利用。不要為了節(jié)省一點(diǎn)小錢,而給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)后續(xù)分析上的困擾。
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