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本生闡述:成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液(茜素紅s法)
更新時(shí)間:2023-03-02瀏覽:1407次

  本生闡述:成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液(茜素紅s法)


  骨代謝是破骨細(xì)胞骨吸收與成骨細(xì)胞骨形成的動(dòng)態(tài)平衡過程,成骨細(xì)胞負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌、礦化,是骨重建激活或終止的控制者,它在骨組織的創(chuàng)傷修復(fù)、骨組織的生長(zhǎng)發(fā)育、骨量平衡中起著重要作用,是骨質(zhì)疏松、骨折等骨病研究的主要焦點(diǎn)。成骨細(xì)胞分化是其主導(dǎo)骨形成的前提與基礎(chǔ),在成骨分化過程中其最基本的生物學(xué)特征是骨基質(zhì)合成、分泌、礦化及成熟,而礦化結(jié)節(jié)是成骨細(xì)胞分化成熟的標(biāo)志,同時(shí)也是成骨細(xì)胞行使成骨功能的主要形態(tài)學(xué)表現(xiàn),觀察成骨細(xì)胞的礦化結(jié)節(jié)是研究成骨細(xì)胞分化的常用手段之一。成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色常用方法有四環(huán)素法和茜素紅S法,應(yīng)用茜素紅溶液對(duì)成骨細(xì)胞染色,茜素紅可與鈣離子螯合,產(chǎn)生深紅色或紫紅色的復(fù)合物,可用于鑒定干細(xì)胞是否已成功向成骨細(xì)胞分化。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

  產(chǎn)品組成:

  2×50mlStorage

  試劑(A):固定液50mlRT

  試劑(B)茜素紅染色液50mlRT,避光

  使用說明書1份

  自備材料:

  1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂)

  2、蒸餾水

  3、顯微鏡

  操作步驟(僅供參考)

  1、成骨細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng),胰酶消化,接種培養(yǎng)于6孔板中,每孔1×105個(gè)細(xì)胞。

  2、細(xì)胞聯(lián)系觀察、換液,培養(yǎng)14天。

  3、小心吸除培養(yǎng)液,加入足量固定液固定15min

  4、磷酸鹽緩沖液(1×PBS)洗滌各孔3次,每次3min。

  5、加入茜素紅s染色液600μL 染色30min,可根據(jù)染色情況酌情增加或減少染色時(shí)間。

  6、蒸餾水洗去染色液,肉眼可見細(xì)胞呈明顯的紫紅色。

  7、光鏡下觀察拍照。

  染色結(jié)果:

  鈣結(jié)節(jié) 紫紅色-深紅色

  注意事項(xiàng):

  1、茜素紅s染色時(shí)間要根據(jù)鈣鹽的含量來確定,一般情況下30min即可。

  2、固定液宜揮發(fā),開啟后應(yīng)密封保存;如使用量大可用95%乙醇替代。

  特別提醒:

  1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。

  2) 本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時(shí)佩戴口罩/手套/實(shí)驗(yàn)服并遵守生物實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程!

  成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液(茜素紅s法) 天津本生 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來。


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